| 去除內(nèi)毒素
內(nèi)毒素也叫熱源，一般是磷脂a、糖類和蛋白的復(fù)合分子，在中性條件下帶有負(fù)電荷。
內(nèi)毒素的磷脂部分有很強(qiáng)的疏水性，在高鹽情況下會聚合，所以很少用疏水色譜，如果蛋白本身的疏水性強(qiáng)，可以選擇把目標(biāo)蛋白結(jié)合到疏水色譜填料（苯基瓊脂糖凝膠FF，丁基瓊脂糖凝膠FF）上和內(nèi)毒素分離。但是如果蛋白疏水性不強(qiáng)也可以嘗試能不能掛內(nèi)毒素而去除。
內(nèi)毒素帶有很強(qiáng)負(fù)電荷，如果目標(biāo)蛋白帶陽電荷，用DEAE瓊脂糖凝膠FF或Q瓊脂糖凝膠FF把內(nèi)毒素吸附，達(dá)到去除內(nèi)毒素的目的。如果目標(biāo)蛋白帶陰電荷，可以嘗試用階段或梯度洗脫的方法把它們分離。
其中最有效而特異的方法是用親和色譜填料去除內(nèi)毒素，為此我們專門開發(fā)了一種專門去除內(nèi)毒素的色譜填料即去內(nèi)毒素親和填料FF和高效去內(nèi)毒素親和填料FF，配基為USP級別藥品，填料為藥品級別的材料，配基不脫落，安全性好，可以很方便去除內(nèi)毒素，其使用簡便，效果明顯，樣品回收率高，產(chǎn)品可以重復(fù)使用，成本低。已廣泛應(yīng)用于蛋白，抗體，核酸，病毒，多糖等產(chǎn)品的內(nèi)毒素去除，可以做到<5EU/mg或ml,方法是把適量的色譜填料加到樣品中4-25度震蕩20-40h左右無菌過濾就可以得到熱源符合要求的樣品。配基是USP級別的藥品，有專門結(jié)合磷脂a位點，在使用過程不脫落，安全性好，是常規(guī)方法失效后最有效去的方法。
去除核酸
大量的核酸會使樣品的粘度增加，影響傳質(zhì)從而影響分離效果，此外在藥品檢驗中對核酸的含量也有嚴(yán)格的規(guī)定，所以去除核酸非常重要。
核酸帶有陰性的電荷，可用陰離子交換色譜填料DEAE-瓊脂糖凝膠 FF或Q-瓊脂糖凝膠 FF 去除，也可以用陽離子色譜填料：SP-瓊脂糖凝膠 FF或CM瓊脂糖凝膠 FF直接把目標(biāo)蛋白吸附而去除核酸。它們屬于最新一代的離子交換填料，載量高，分辨率好。
在2-3M硫酸銨的條件下，RNA和DNA都可以被苯基瓊脂糖凝膠FF吸附。
此外也可以用核酸酶處理樣品，把核酸降解成小片段，用瓊葡糖凝膠FF凝膠過濾填料就可以去除。此外也可用DNA純化瓊脂糖凝膠FF去除。
去除病毒和微生物
微生物和病毒是病原或者熱源的來源，產(chǎn)生的酶也可能分解產(chǎn)物，因此要盡量去除干凈。微生物可以通過嚴(yán)格的過濾方法控制，而病毒也可以用凝膠過濾去除，因為它們比普通的蛋白或核酸大，一般在外水體積全排阻。也可以在樣品中加Triton和吐溫后，再過CM或SP-瓊脂糖凝膠 FF吸附目標(biāo)蛋白得去除。配合各種色譜技術(shù)以及在位清洗和消毒都可以盡量減少這些病原體的污染。
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